Nhân giống hoa đồng tiền bằng phương pháp in vitro

Ưu điểm: Phương pháp nhân giống này có thể khắc phục được nhược điểm của khác về hệ số nhân giống. Số lượng cây nhiều, cây sạch, chất lượng hoa tốt và đồng đều. 

Quy trình nhân giống hoa đồng tiền bằng phương pháp in vitro:

-        Tạo tài liệu nguồn:

•   Nguyên liệu ban đầu rất quan trọng, nó quyết định chất lượng của các nguyên tố tạo ra. Chọn lọc những cá thể tốt, sinh trưởng tốt từ quần thể đã chọn lọc. Trồng trong bầu với giá thể trấu cong để giảm thiểu tỷ lệ nhiễm bệnh. Sau khi trồng khoảng 2 - 3 tuần có thể lấy mẫu để trồng trọt.
•   Ngọn mọc của cây là bộ phận dùng để thực hiện phương pháp trồng trọt.

-   Khử trùng mẫu sạch:

•   Từ những cá thể khỏe mạnh, loại bỏ lá và đưa ra lời khuyên về sự phát triển.
•   Rửa đầu tăng trưởng bằng xà phòng, sau đó rửa lại bằng nước cất, cho vào lọ để khử trùng.
•   Ngâm khoảng 1 phút trong cồn 70 độ, sau đó rửa sạch bằng nước cất, tiếp theo ngâm khoảng 5 phút với calcium hypochloride 15% rồi rửa sạch bằng nước cất.

-        Tái sinh chồi:

•   Tiến hành tách chồi ngọn và chồi nách có đường kính khoảng 5mm bằng dao chuyên dụng. Tiếp theo là cấy vào bình nón với môi trường dinh dưỡng thích hợp.
•   Môi trường dinh dưỡng được bổ sung: 3% sucrose, chất kích thích ba cytokinin 0,7 mg / lít.
•   Sau 3 tháng, các gai sinh trưởng biến thành các cụm chồi với nhiều kích cỡ khác nhau.

-  Nhân nhanh các chồi:

• Các cụm chồi, nên được tách thành các chồi riêng biệt để nhân nhanh.
• Tiến hành cho các chồi mới tách vào các bình có môi trường có bổ sung: sacaroza 3%, thạch 9g/lít, ba kích 0,5 mg/lít, ga3 0,1 mg/lít. ph = 5,8.
• Sau khoảng 2 tháng nếu phát triển tốt sẽ cho 4 - 5 nụ/chùm.
• Cụm chồi sẽ phát triển thành cây con 30 - 40mm, lá non màu xanh.

- Giữ cây: Sau khi cây đạt kích thước 30 – 40 mm. nuôi cấy được thực hiện trong môi trường mới bổ sung 3% sucrose, 9 g/lít thạch, 0,5 mg/lít ba, 0,3 mg/lít ga3, pH 5,8. để duy trì cây. Khoảng 1 tháng cây đạt kích thước 40 – 60mm là đạt yêu cầu.

- Tạo cây đầy đủ:

• Muốn chuyển cây ra khỏi vườn ươm, cây con phải đảm bảo sinh trưởng, phát triển bộ rễ đầy đủ. Sau khi cây được 40 - 60mm, chuyển sang môi trường cộng với bổ sung: 3% sacaroza, 9g/lít agar, 0,3mg/lít naa, 2g/lít than hoạt, ở pH 5,8.
• Sau khoảng 2 tháng, cây con sẽ có kích thước 7 - 10cm, bộ rễ phát triển đầy đủ.

- Đưa cây về vườn ươm:

• Tách cây ra khỏi cây tam thất, rửa sạch giá thể gốc, để ráo nước.
• Chuẩn bị môi trường và khay để ủ. Tiến hành nhổ cây và trồng vào khay ươm.